PRACTICA DE LABORATORIO

PRÁCTICA 1: EXTRACCIÓN DE ADN

COMPETENCIA: Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.

DESEMPEÑO: Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.

OBJETIVO:

·         Realizar la extracción de ADN de células vegetales poniendo de manifiesto su estructura fibrilar.

MATERIALES:

·         Tejido vegetal (plátano)

·         Trozo de tela para filtrar

·         Pipeta

·         Alcohol 96°

·         Mortero

·         Varilla de vidrio

·         Solucion NaCl 2M

·         Embudo

·         Probeta

·         Vaso de precipitados

·         Detergente tipo lavavajillas

PROCEDIMIENTO:

1.    Triturar en frio la muestra de plátano en el mortero.

2.    Añadir 50mL de agua y remover suavemente pero mezclando a fondo.

3.    Filtrar varias veces el resultado a través de un pedazo de tela.

4.    Añadir al filtrado resultante un volumen igual de solución de NaCl 2M

5.    Añadir 1mL de detergente mezclando suavemente sin hacer espuma. Repetir varias veces dejando reposar un minuto cada vez.

6.    Añadir 50 mL de alcohol muy frío ladeando el tubo o vaso de precipitado  y dejando  resbalar muy lentamente  el alcohol  por la pared  de aquel para formar una capa sobre la solución  anterior. Es muy importante evitar  que se mezclen ambas solucione , pues en la interfase precipitará el ADN.

7.    El ADN irá apareciendo poco a poco en la interfase agua-alcohol en forma de grumos blancos. Se favorece la precipitación y recolección si se va recogiendo mediante una varilla de vidrio, introduciendola ligeramente bajo la interfase y haciéndola girar suavemente miestras se extrae.

8.    Se puede tomar una muestra del ADN recogido, depositarla sobre un portaobjetos y teñir con azul de metileno durante 3 minutos. Tras limpiar el portaobjetos, observar al microscopio.

9.    Describe lo que observas y haz un esquema

CUESTIONARIO

1.    ¿Qué papel juegan el lavalozas o detergente y el tenedor en la primera parte de la extracción?

2.    ¿Por qué utilizamos el alcohol para separar el ADN de las células?

3.    Dibuja tus observaciones